در این تحقیق، ویژگی های بیوشیمیایی آنزیم تریپسین تخلیص شده از روده ماهی کیلکای معمولی(Clupeonella cultriventris caspia) شامل دما و pH بهینه، دما و pH پایداری، اثر بازدارنده های آنزیمی، یون های فلزی، سورفاکتانت ها و عوامل اکسیدکننده مورد بررسی قرارگرفت. نتایج نشان داد دما و pH بهینه آنزیم تریپسین به ترتیب °60C و 8 و پایداری دمایی و pH آن به ترتیب تا °50C و 10-7 تعیین گردید. بازدارنده های SBTI و TLCK، به عنوان دو بازدارنده اختصاصی آنزیم تریپسین، اثر مهارکنندگی کاملی بر فعالیت آنزیم تریپسین داشتند (05/0>P). یون های Ca2+ و Mg2+ سبب افزایش معنی دار و یون های +Cu2+،Ba2+،Co2+،Zn2+،Fe2+ و Al+3 باعث کاهش معنی دار فعالیت آنزیم تریپسین گردیدند (0.05>P). یون های K+ و Na+اثر معنی داری بر فعالیت آنزیم تریپسین نشان ندادند (0.05>P). فعالیت آنزیم تریپسین در حضور سورفاکتانت های ساپونین و سدیم کولات افزایش معنی دار (0.05>P) و در حضور سدیم دودسیل سولفات و عوامل اکسیدکننده (سدیم پربورات و پراکسید هیدروژن) کاهش معنی داری (0.05>P) را نشان داد. ویژگی های بیوشیمیایی آنزیم تریپسین نشان داد که این آنزیم می تواند در آینده برای استفاده در صنایع مخلتف مدنظر قرار گیرد.